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张总 先生
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发布时间:2020-10-18 14:03:17
RPA
RPA 便携、等温,可替代 PCR ,非常适合用于分子检测***、动物、食品安全、生物防御和农业中。
速度—— 检测时间 15 分钟以内;
敏感度—— 单分子检测,不需要 thermocyler ;
简单—— 稳定的冻干***,几乎没有硬件要求的可靠等温技术。
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RPA 的概念
概念:重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性,反应温度在37°C左右。
RPA原理
重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物***了同源序列,就会发生链交换反应形成并启动DNA合成,对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合,防止进一步替换。在这个体系中,由两个相对的引物起始一个合成事件。整个过程进行得非常快,一般可在十分钟之内获得可检出水平的扩增产物。
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