安普未来公司询问报价“本信息长期有效”

突破传统桎梏，将分子检测带入一个新领域

具体操作方法如下：

1. 采用我司自主开发的快速核酸释放剂提取核酸（核酸释放剂与样本混匀，室温静置5分钟即可取上清作为核酸模板），或者采用市场常见“离心柱法”和“磁珠法”提取核酸作为模板亦可；

2. 取上述模板2μL加入到复融后的反应液中，通过上述各种加热手段，保证加热温度在37°~42°之间10分钟即可。

3. 上述反应时间结束后，向反应液中加入少许无菌水稀释，后直接插入试纸条，则马上可通过试纸条上的条带颜色变化，从而判定阴阳性。

2 自主研发用时，引物设计注意事项：

核酸试纸条三明治夹心检验法探针设计：在上下游引物中间设计一条长度为46-52nt与目的片段互补序列；5’端修饰一个抗原标记（典型FAM）;5’端和3’端中间位置标记一个dSpacer(THF)；3’端标记一个修饰基团，如胺基、生物素或C3-Spacer，同时要求下游引物5’端标记一个修饰基团。

安普未来生物 MIRA 助力新冠疫情一线！

新型冠状病毒现在准确的确诊方法是核酸检测，但传统的荧光定量PCR方法需要采取病毒提取、反转录、荧光定量扩增等多步操作，完成整个检测实验长达3小时以上。并且该病毒有可能通过气溶胶传播，实验中病毒的核酸提取过程需要多步骤处理标本，操作复杂，检测人员被染的风险几率高。为了很快控制住疫情，我们迫切需要一种更安全、简便、快速的检测方法，这就是安普未来的新型冠状病毒恒温快速检测方法。

潍坊安普未来生物科技有限公司创业团队，历经十年自主研发出多酶恒温快速扩增(即Multienzyme Isothermal Rapid Amplification ，以下简称MIRA)技术，这是一种恒温核酸快速扩增技术，依靠多种功能蛋白在常温下完成核酸的快速扩增，可替代目前的聚合酶链反应 (PCR)技术。

除了前述的胶体金跨速核酸检测法以外，公司还具备荧光型检测方法。结合本公司所独创的超快速核酸提取***（5分钟提取DNA/RNA用于扩增）和荧光检测仪，可将整个核酸检测实验的全部时间缩短至8至20分钟内完成。

恒温快速扩增***盒原理概述

本***盒基于一种常温恒温核酸快速扩 增技术:在常温恒温条件下，重组酶和引物形成蛋白单链核苷酸的复合体Rec/ssDNA,在辅助蛋白和单链结合蛋白SSB的帮助下，***双链DNA模板，在***位点形成D-loop区域，并开始对DNA双链进行扫描;待找到与引|物互补的目的区域后,复合体Rec/ssDNA解体的同时，聚合酶也结合到引|物的3'末端，开始链的延伸。本***盒在39。C下，依赖核酸外切酶的作用，加入根据模版设计的特异的分子探针，使用荧光监测设备能实现对目标片段扩增过程的实时监控。

恒温快速扩增***盒操作步骤

提前30分钟将***盒所需组分取出，室温融化，震荡混匀。

1) 每个干粉反应管加入29.4 μL A buffer（注意：A buffer需完全融化混匀，否则会对实验效果产生影响）；

2) 每个反应管分别加入2 μL上游引物、2 μL下游引物和0.6 μL探针（引物和探针浓度为10 μM，对于多个反应、步骤1和步骤2可以混合后再分装至反应管中）；

3) 向反应管中依次加入11.5 μL ddH2O和2 μL核酸模板（可根据核酸浓度调整加入的核酸模板体积，并相应调整加入的ddH2O体积，至模板与ddH2O总体积为13.5 μL）；

4) 然后向反应管中加入2.5 μL B buffer并充分混合（对于多个反应，建议将B buffer加至反应管的盖子内侧，上下颠倒反应管8-10次混匀）；

5) 混匀后，将反应液甩（或快速离心）至管子底部，然后立即将反应管放入恒温设备中37-39 oC孵育8-12 mins；

6) 反应结束后，取10 μL加入含有190 μL ddH2O的离心管中，混合均匀后，将胶体金试纸条的样品端插入离心管中平衡，5 mins内观察质控线与检测线判读结果。