安普未来恒温扩增***盒价格服务为先「在线咨询」

多酶恒温快速扩增技术在大动物分子诊断领域的应用

————MIRA助力猪疫病的检测

2018年10月开始的非洲猪疫情，很大的冲击了中国生猪养殖市场和屠宰市场。造成了市场格局的大幅变化，也提升了***和民众对畜牧养殖的认识和重视，从简单的关注食品安全开始向关注食材原料安全转移。随着疫情的逐渐缓和，疫情的检测主体已经从生猪检测向环境监控转化。例如，厂区周边取样、运送生猪的车辆取样、进出人员的衣物取样等。这些预防性检测已占据养殖场日常检测量的80%以上，因此对养殖过程中诊断提出了更高的要求，需要便携、快捷、易操作、便于临场检测的新技术，而传统PCR检测技术存在检测时间长、人员技术要求高和设备昂贵等特点，在实际应用上，越来越不适合畜牧养殖等非***区域的检测需求。而我司的MIRA技术恰恰可以弥补上述缺陷。MIRA多酶恒温快速扩增技术，模仿细胞内核酸过程，在体外、常温、恒温的状态下实现核酸的指数式扩增。其核心就是利用多酶系统替代以往利用精密温控设备（PCR仪）才能完成的变性、退火、延伸等流程。

多酶恒温快速扩增技术具有以下特点

1、检测精度更高，本技术检测目标为核酸，灵敏度可以达到10个拷贝的数量级；2、“小、快、非***操作”，本技术对应的仪器其小而便捷，对操作技能要求不高，检测时间短（5-15分钟可判定检测样本的阴阳性），可广泛用于野外、兽医站、养殖基地等场景。3、果判读的方式也多种多样：凝胶电泳型、荧光定量型和胶体金试纸条型。本技术能够实现在动物疫病检测领域中即时检测的要求，满足了养殖业转型升级对现代兽医服务的迫切需求，为动物疫病防控工作以及现代养殖业的可持续发展保驾护航。

同时，安普未来也提供可自主开发的科研类***，通过指导使用者自行设计引物与探针，从而令广大用户均可实现自主开发分子快速检测***，实现20分钟内完成核酸扩增、判读结果。

恒温快速扩增***盒操作步骤

提前30分钟将***盒所需组分取出，室温融化，震荡混匀。

1) 每个干粉反应管加入29.4 μL A buffer（注意：A buffer需完全融化混匀，否则会对实验效果产生影响）；

2) 每个反应管分别加入2 μL上游引物、2 μL下游引物和0.6 μL探针（引物和探针浓度为10 μM，对于多个反应、步骤1和步骤2可以混合后再分装至反应管中）；

3) 向反应管中依次加入11.5 μL ddH2O和2 μL核酸模板（可根据核酸浓度调整加入的核酸模板体积，并相应调整加入的ddH2O体积，至模板与ddH2O总体积为13.5 μL）；

4) 然后向反应管中加入2.5 μL B buffer并充分混合（对于多个反应，建议将B buffer加至反应管的盖子内侧，上下颠倒反应管8-10次混匀）；

5) 混匀后，将反应液甩（或快速离心）至管子底部，然后立即将反应管放入恒温设备中37-39 oC孵育8-12 mins；

6) 反应结束后，取10 μL加入含有190 μL ddH2O的离心管中，混合均匀后，将胶体金试纸条的样品端插入离心管中平衡，5 mins内观察质控线与检测线判读结果。