天津安普未来恒温扩增***盒报价常用解决方案「多图」

突破传统桎梏，将分子检测带入一个新领域

如何将传统分子检测方法变的更加简单易懂、操作方便和快速精准。一直是分子检测行业的一大课题。各个厂家和科研院所都在这方面投入了大量的时间和金钱。

安普未来有幸在该领域完成了突破和革新。在荧光检测领域，自主研发的MIRA技术将60分钟以上的核酸扩增阶段，缩短到20分钟。其开发了“核酸胶体金试纸条检测法”，可彻底抛弃掉高昂的检测设备，仅需配备简单的温控仪器即可（如金属浴、水浴锅等），甚至42°温水和利用***温度亦可完成扩增反应，且核酸扩增时间进一步缩短到10分钟不到。其结果的准确率与传统PCR检测方式准确率一致。

具体操作方法如下：

1. 采用我司自主开发的快速核酸释放剂提取核酸（核酸释放剂与样本混匀，室温静置5分钟即可取上清作为核酸模板），或者采用市场常见“离心柱法”和“磁珠法”提取核酸作为模板亦可；

2. 取上述模板2μL加入到复融后的反应液中，通过上述各种加热手段，保证加热温度在37°~42°之间10分钟即可。

3. 上述反应时间结束后，向反应液中加入少许无菌水稀释，后直接插入试纸条，则马上可通过试纸条上的条带颜色变化，从而判定阴阳性。

2 自主研发用时，引物设计注意事项：

核酸试纸条三明治夹心检验法探针设计：在上下游引物中间设计一条长度为46-52nt与目的片段互补序列；5’端修饰一个抗原标记（典型FAM）;5’端和3’端中间位置标记一个dSpacer(THF)；3’端标记一个修饰基团，如胺基、生物素或C3-Spacer，同时要求下游引物5’端标记一个修饰基团。

安普未来的解决方案操作十分简单

1核酸提取

直接取咽拭子等样品放入管A中（含裂解液，可灭活病毒）；

管A放入95℃-100℃水浴或者金属浴10分钟；2扩增反应

向含有冻干***（冻干***包含了生物酶与各反应组分；可常温运输，便捷）的反应管中加入42.5 μL R buffer使其复溶；

取核酸提取步骤中提取完成的样本3-5μL 加入反应管；

然后在反应管加入2.5μL启动B buffer，盖上盖充分混匀后上机反应。反应温度为42℃，时长20min，实时显示荧光扩增曲线。其结果分析与荧光定量PCR类似，简单易懂。

恒温快速扩增***盒操作步骤

提前30分钟将***盒所需组分取出，室温融化，震荡混匀。

1) 每个干粉反应管加入29.4 μL A buffer（注意：A buffer需完全融化混匀，否则会对实验效果产生影响）；

2) 每个反应管分别加入2 μL上游引物、2 μL下游引物和0.6 μL探针（引物和探针浓度为10 μM，对于多个反应、步骤1和步骤2可以混合后再分装至反应管中）；

3) 向反应管中依次加入11.5 μL ddH2O和2 μL核酸模板（可根据核酸浓度调整加入的核酸模板体积，并相应调整加入的ddH2O体积，至模板与ddH2O总体积为13.5 μL）；

4) 然后向反应管中加入2.5 μL B buffer并充分混合（对于多个反应，建议将B buffer加至反应管的盖子内侧，上下颠倒反应管8-10次混匀）；

5) 混匀后，将反应液甩（或快速离心）至管子底部，然后立即将反应管放入恒温设备中37-39 oC孵育8-12 mins；

6) 反应结束后，取10 μL加入含有190 μL ddH2O的离心管中，混合均匀后，将胶体金试纸条的样品端插入离心管中平衡，5 mins内观察质控线与检测线判读结果。